实验室冻干机操作指南：从样品制备到冻干完成

　　冻干（冷冻干燥）是通过低温冻结、真空升华去除样品中水分的技术，广泛应用于生物样本保存、药物研发及食品工业等领域。规范操作是保障冻干效果与设备安全的关键，以下为从样品制备到冻干完成的全流程指南。

　　一、前期准备：设备与环境检查

　　操作前需确保实验室冻干机状态正常。首先检查主机、真空泵、冷阱、冷凝器是否清洁无杂物；确认电源稳定，真空管路连接紧密无泄漏；查看冷阱温度预冷至-50℃以下（具体依机型调整），真空泵油位在标线范围内。同时，清理操作台面，备好防护手套、护目镜及样品容器（如西林瓶、培养皿），避免交叉污染。

　　二、样品制备：预处理决定冻干质量

　　样品质量是冻干成功的基础，需注意三点：

　　1.浓度与体积：液体样品建议浓度5%-20%（过高易形成硬壳阻碍升华），单次装载量不超过托盘容量的70%，预留升华空间；固体样品需粉碎至均匀颗粒（粒径≤5mm），避免堆积过厚。

　　2.防溢与固定：液体样品需用封口膜轻盖容器（留微小透气孔），防止真空抽吸时液体沸腾溢出；若使用西林瓶，需旋紧胶塞但保留约1mm缝隙，避免全密封导致内部压力骤增。

　　3.特殊样品处理：含表面活性剂或易氧化成分的样品，可添加保护剂（如10%蔗糖）；微生物样本需先离心收集菌体并悬浮于缓冲液，减少代谢干扰。

　　三、装样与上机：均匀摆放与参数设定

　　将预处理后的样品均匀放置于冻干托盘，避免堆叠或贴壁（影响热量传递）。关闭冻干仓门，启动程序前需根据样品特性设置关键参数：

　　•预冻阶段：若样品未提前冻结，需先开启预冻功能（-40℃至-80℃，维持2-4小时），确保样品冻结成固态（可通过观察窗确认无液态残留）；已预冻的样品可直接进入主干燥。

　　•主干燥（升华阶段）：设定冷阱温度-60℃至-80℃，真空度10-30Pa（过高易导致样品熔化，过低延长周期）。此阶段持续至样品重量不再明显下降（约占总时间的60%-70%）。

　　•解析干燥（去结合水）：缓慢升温至20-40℃（依样品热稳定性调整），维持真空度，直至样品残余水分≤5%（可通过称重法监测）。

　　四、冻干过程监控与应急处理

　　运行中需定时观察：①真空度是否稳定（波动＞5Pa需检查密封性）；②冷阱结霜厚度（超过2/3需暂停除霜）；③样品外观（若出现塌陷、鼓泡，可能是预冻不充分或真空度骤变，需立即降低升温速率）。若遇停电，保持仓门关闭，待恢复后重新抽真空；若真空泵异常，先关闭主机再排查故障。

　　五、冻干完成与后续处理

　　当系统提示“干燥完成”，先缓慢泄压（避免气流冲击样品），取出托盘。样品需在干燥器内冷却至室温后密封（可充氮或加干燥剂），标注名称、日期及冻干条件。最后清洁冻干仓与托盘（用75%乙醇擦拭），排空冷阱霜层，关闭总电源，完成全流程。

　　规范操作不仅能提升冻干效率，更能保障样品活性与数据可靠性。实践中需结合具体机型说明书灵活调整参数，积累经验以优化流程。